INMUNOFLUORESCENCIA

Esta técnica permite poner en manifiesto los Ag's víricos en el interior de las celulas.
Método directo: Ac en suero especifico antivirico marcado con el fluorocromo, se aplican los Ag's a modo de tinción directa, y se observan a traves de un microscopio de luz UV .
Método indirecto: Esta presente el Ag mas el anticuerpo antivirico NO MARCADO, a esta primera reacción se le agregan los Ac's globulinicos marcados (especificos), dandose la segunda reaccion que sera observada en un miceoscopio de luz UV

RADIACIONES

Por Aguilar Lemus Jonathan 3 de Marzo de 2010

El termino radiación corresponde a un amplio espectro de formas de energía que se trasmiten por ondas electromagnéticas.

Dentro de este espectro se incluyen dos tipos de radiaciones:

Radiaciones no ionizantes :Como la luz uv la cual tiene un mecanismo de acción sobre los aminoácidos aromáticos de las proteínas y las bases puricas y pirimidicas, en particular la timina del DNA con el que forma dimeros. Evitando la replicación de las tiras del DNA o causando recombinaciones que terminan en mutaciones mortales.

Radiaciones ionizantes: Como los rayos gamma o X éstos inducen primariamente importantes alteraciones estructurales en el DNA mediante cambios estructurales de los ácidos nucleicos y las proteínas, estas radiaciones son muy eficaces para inactivar a los virus tanto de bicatenarios como monocatenarios.

PCR (Oscar Waldo Moreno)

Este es un video de como se realiza la tecnica de pcr esta muy bien ejemplificado ojala les guste.

Tecnica de Reed y Muench (Oscar Waldo Moreno)

Encontre una pagina que esta muy bien explicada y ademas maneja otras tecnicas de titulacion viral por el metodo de punto final 50%, como lo son: conteo de particulas virales, metodos de titulacion por el punto final, metodos de plaqueo y expresion de la multiplicidad por infeccion. Es una pagina del Instituto de Virología - C.I.C.V. - INTA, aqui encontraran mejor explicado mi exposicion y con ejemplos mas claros, favor de seguir este hipervinculo.

INACTIVACIÒN FOTODINÁMICA

La exposición de los virus a colorantes vitales en presencia de la luz causa una ràpida inactivación.

Los virus pueden dejarse penetar en grado variable por colorantes vitales. Estos colorantes se unen al ácido nucleico viral, y el virus adquiere susceptibilildad a la inactivacion por la luz visible.

Para que se produzca el efecto se requiere O2, mientras que la temperatura y el pH afectan la velocidad; por tanto, la acción química es probablemente una oxidación mediante las formas de los colorantes activadas por la luz.
Ejemplos de colorantes:
> Acridinas: Naranja de Acridina
> Azul de metileno
> Azul de toluidina
> Rojo neutro

ADRIANA FLORES PUCHETA

HEMAGLUTINACION

La hemoaglutinación es un método donde no se mide la capacidad infecciosa de las partículas virales. Es una técnica indirecta para medir partículas virales, pues en realidad mediante esta técnica se mide la cantidad de partículas hemoaglutinantes (proteínas virales) independientemente si estas están incluidas en la partícula viral o libres como antígeno. La hemoaglutinación es uno de los métodos indirectos más comunes para cuantificar partículas virales y/o antígenos virales hemoaglutinantes en suspensión.

En esta los eritrocitos se pueden sensibilizar con diversos antígenos y se pueden usar como un sistema indicador. Así, si se descubren los anticuerpos, la reacción se revelará como una hemoaglutinación que se puede advertir a simple vista.

Existe una gran cantidad de antígenos que se pueden unir a los glóbulos rojos, entre ellos los carbohidratos que se adhieren con rapidez. En el caso de las proteínas se requiere un proceso de pretratamiento con ácido tánico o con cloruro de cromo.

El título de una hemoaglutinación está determinado por la última dilución de una serie, en donde se observa, macroscópicamente, una malla formada por la unión del virus y/o antígeno libre a receptores en la membrana de los glóbulos rojos y en la siguiente dilución un sedimento o “botón” de glóbulos rojos.

ATTE: Angel

INHIBICION DE LA HEMAGLUTINACION

La inhibición de la aglutinación de eritrocitos recubiertos de antígeno por el antígeno homólogo, es un método muy sensible y específico para detectar pequeñas cantidades de antígeno soluble en la sangre u otros líquidos tisulares. El principio de este análisis es que el anticuerpo preincubado con antígenos homólogos solubles o de reacción cruzada, será “inactivado” cuando se incube con eritrocitos recubiertos de antígeno. Así, la prueba se lleva a cabo en dos etapas. El anticuerpo en una concentración relativamente baja, se incuba con una muestra del antígeno de cantidad desconocida. Después de su combinación con antígeno soluble, se añaden las células recubiertas de antígeno y aglutinan por medio de anticuerpo libre o no combinado. ( El grado de inhibición de la aglutinación refleja la cantidad de antígeno presente en la muestra original). Se deberán emplear los controles que abarcan muestras de concentración conocida de antígeno, y eritrocitos no cubiertos.

ATTE: Angel